Relatorio

CONTAGEM DE CÉLULAS DE LEVEDURA EM CÂMARA DE NEUBAUER E POR “POUR-PLATE” E “SPREAD-PLATE”

1. INTRODUÇÃO

Além da identificação do tipo do microrganismo de um meio, também é importante em alguns casos sua quantificação. Os microrganismos podem ser quantificados de forma direta, contando-se microscopicamente o número de células presentes num determinado material ou superfície, ou indiretamente, efetuando-se análises da turbidez, determinação do peso seco, concentração de substâncias químicas (proteínas, pesquisa de determinada enzima ou produto final de uma via metabólica, DNA, RNA) ou através da contagem do número de microrganismos viáveis utilizando um meio de cultura apropriado.

Esse último método leva em consideração um “quesito” importante para a técnica de contagem, que é a quantificação de apenas células vivas. Pois, em determinadas circunstâncias, como aquelas em que se avalia as práticas higiênico-sanitárias, é preciso determinar a população de células viáveis. Quando se trabalha com bactérias que formam endósporos ou fungos, muitas vezes, deseja-se determinar o número de esporos/ml da suspensão preparada. Uma das formas mais comuns de se obter esta estimativa é através do uso da câmara de Neubauer, também conhecida como hemacitômetro. A câmara de Neubauer consiste de uma lâmina de microscopia, bem mais alta do que uma lâmina normal, com marcações em quadrantes, de medidas conhecidas. Observando-se ao microscópio, percebe-se que existem três tipos de quadrantes denominados A, B e C, que juntos formam um quadrado maior.

Pode-se notar que estes quadrantes têm subdivisões diferentes, fazendo com que o critério para escolha do quadrante onde serão contados os esporos, seja o tamanho dos esporos a serem quantificados. Assim, usualmente, esporos muito pequenos são contados no quadrante C, os de tamanho intermediário no quadrante B, enquanto esporos grandes são contados no quadrante A. E, para efetuar a contagem