relatorio de microbiologia
Campus Sorocaba
Licenciatura em Ciências Biológicas
Disciplina de Biologia de Microrganismos Procariontes
Aula Prática IV
Quantificação de Microrganismos
1. Introdução
Um aspecto importante estudado na microbiologia é a determinação da quantidade de microrganismos presentes em um meio, que pode ser feita de maneira direta ou indireta (TORTORA, 2012).
Na determinação do número de bactérias por métodos indiretos são usados meios como a estimativa da turbidimetria de um meio líquido, a medição da atividade metabólica de uma população, e o peso seco de uma colônia (TORTORA, 2012), ou seja, sem considerar a contagem das células em si, como acontece na contagem direta.
Para a medida direta do crescimento microbiano também são utilizadas diversas técnicas, como contagem direta de células ao microscópio, determinação do número mais provável (MNP) de bactérias presentes em uma amostra, filtração de amostras muito diluídas para a concentração das bactérias, e a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC) em placas (TORTORA, 2012).
Este último, usado com mais frequência, mede o número de células viáveis em uma amostra, ou seja, aquelas que podem crescer e se dividir para formar uma colônia. Neste método de contagem direta são feitas diluições seriadas de uma amostra, uma vez que a amostra original pode conter um número muito grande de bactérias, que formariam muitas colônias e tornariam a contagem inviável (TORTORA, 2012).
A contagem em placas engloba duas técnicas possíveis: o espalhamento em placas (ou semeadura em superfície) e a incorporação em placas (ou semeadura em profundidade, ou Pour Plate). No método de espalhamento em placas uma amostra da diluição seriada é inoculada sobre ágar nutriente previamente solidificado e espalhada por toda sua superfície, onde crescerão as unidades formadoras de colônias a serem contadas. Já na incorporação em placas, a amostra da diluição é inoculada na placa de Petri