Relatorio contagem em placas

UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAÍBA
CENTRO DE TECNOLOGIA
DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA DE ALIMENTOS

Ana Carolina Guimarães
Bruna Gadelha
Bianca Beatriz
Fellipe Carvalho
Nayara Louise

Contagem de Bactérias Totais em Leite Pasteurizado

Relatório acadêmico apresentado como requisito parcial de avaliação da disciplina de Laboratório de Microbiologia de Alimentos II, ministrada pela Prof.ª Dr.ª Janeeyre Ferreira, no 1º semestre de 2015.

Abril de 2015
1.0 Contagem em placas

1.1 Introdução
Para determinar a quantidade de bactérias de uma amostra são utilizadas técnicas de contagem de microrganismos. Dentre essas práticas, destacamos as técnicas de espalhamento em superfície (spread-plate) e em profundidade (pour-plate).
Ambas as técnicas consistem em sucessivas diluições da amostra, sendo que no spread-plate a diluição é espalhada em placas de Petri contendo meio de cultura, 0,1 ml da amostra. Já a segunda técnica, pour-plate tem como meio de cultura o ágar fundido que permite o crescimento não só ao longo da superfície como no interior do ágar. São adicionados 1,0 ml da amostra diluída no fundo de uma placa estéril e em seguida adicionado o ágar, ainda líquido, mantido a cerca de 40-45°C. É preciso garantir que o meio não solidifique antes da homogeneização nem fique muito quente para não matar as células microbianas. Também conhecido como métodos das diluições seriadas, estes métodos servem tanto para o isolamento quanto para contagem de microrganismos. Após a incubação, por tempo e temperatura adequados, as células ou pequenos agrupamentos vão crescer isoladamente, dando origem a colônias que serão contadas na diluição apropriada e, portanto, chamadas de unidades formadoras de colônia (UFC).
Evidentemente, nos tubos muito diluídos não teremos células suficientes, ao mesmo tempo em que nos tubos muito concentrados teremos excesso de células, e assim sendo não será possível se fazer uma contagem adequada nas respectivas placas. O ideal é que cada placa