Relatorio BIO

Universidade do Algarve
Faculdade de Ciências do Mar e do Ambiente

Método DNS

Quantificação de açúcares redutores

espectrofotómetro

Docente:
Prof. Isabel Saraiva de Carvalho

Disciplina: Bioquímica I

Discentes:

1.Resumo
O presente trabalho analisou a composição dos açúcares presentes, em dois tipos de sumos diferentes, um ligth e um de carácter normal, a fim de verificar se estes se encontravam dentro dos parâmetros estabelecidos no rótulo. As análises feitas foram a determinação do teor de açúcares redutores, pelo método (DNS).

2.Objectivos
Quantificar a quantidade de açúcares redutores presentes nas duas diferentes qualidades de sumo.

3. Procedimento

1. Preparou-se um tubo (controlo) branco com 1 ml de água destilada e 1 ml de reagente DNS.
2. Agitou-se vigorosamente e aqueceu-se em banho fervente durante 5 minutos.
3. Arrefeceu-se seguidamente também em banho-maria.
4. Adicionou-se 10 ml de água fervente.
5. Leu-se a absorvência a um comprimento de onda de λ= 540nm. Esta solução servi-o para referenciar o espectrfotómetro.
6. Preparou-se 10 ml de uma solução padrão de glucose com uma concentração de 1 mg/ml e construiu-se a curva das absorvências para as seguintes concentrações: 0,2 mg/ml; 0,4 mg/ml; 0,6 mg/ml; 0,8mg/ml e 1,0 mg/ml. Procedeu-se como anteriormente.
7. A 1 ml de cada amostra adicionou-se 1 ml do reagente DNS. Agitou-se vigorosamente e aqueceu-se em banho-maria.
8. Adicionou-se 10 ml de água destilada.
9. Leu-se a absorvência a um comprimento de onda de λ= 540nm.
10. Determinou-se as concentrações dos açúcares existentes nas amostras a partir da curva obtida.
4. Dados experimentais e análise

Tubos
Glucose mg/ml
Água destilada

Absorvência
1
0,0
1,0
0,004
2
0,2
0,8
0,046
3
0,4
0,6
0,077
4
0,6
0,4
0,338
5
0,8
0,2
0,574
6
1,0
0,0
0,666
Branco
-
1,0
0,049
Ligth
-
-
0,046
“Normal”
-
-
0,116