Relat rio Pronto 2
Isolamento de Patógenos em Células Vegetais
Isolamento de Fungos
O isolamento de fungos pode ser feito diretamente a partir de algum substrato ou de um compartimento ambiental (folha contaminada), utilizando vidraria (tubos de ensaio, placas de petri) e instrumentos (estiletes, pinças) esterilizados, com a manipulação em uma zona de segurança próximo a uma chama.
Para que ocorra o isolamento dos fungos, é necessário oferecer condições propícias para o desenvolvimento dos mesmos.
Protocolos das técnicas
1. Lavar mãos e braços com álcool 70%
2. Cortes pequenos de fragmento com o tecido necrosado e o tecido sadio.
3. Flambar as bordas de uma placa de petri esterilizada (mata qualquer contaminação)
4.Pinça esterilizadas por flambagem na inclinação de 45º
5.Colocar 2 fragmentos da folha 30s no álcool 70%
Para quebra da tensão da superfície da folha
6.Colocar no hipoclorito a 2% por 1 minuto
7.Lavar em água destilada e esterilizada
8.Uso de pinça esterelizada ,para colocar em Placa com papel filtro esterelizada
9.Coloca-se os fragmentos em meio de cultura B.B.A
Todo o processo é realizado dentro de camará de para que não haja contaminação,e no dia 23/03/2015 depois do procedimento foi observado pelo aluno Kivison que analisou o meio de cultura e observou que ouve desenvolvimento do fungo,mas houve alta contaminação nesse experimento e para que possamos corrigir o experimento para analise devemos acidificar o meio ou aplicar antibióticos para eleminar a contaminação.
Isolamento de Bactérias
Na grande maioria das vezes, para que se possa identificar com segurança o agente etiológico de uma doença, faz-se necessário dispor desse organismo, sob forma de cultura pura em meio artificial. Uma vez