Relat rio Glutamato Libera o

Relatório

Influência de soluções iônicas na liberação de glutamato por neurônios da retina de camundongos

Aluno: Leonardo Garcia de Lima Monteiro
Matrícula: 201504740012
Curso: Biomedicina
1-Introdução e objetivo:
Neste estudo foi visado a percepção prática da influência e necessidade de certos íons para a liberação de glutamato por sinapse.

2-Materiais e experimento:
Os materiais usados neste experimento foram:
4 retinas de camundongos
1 solução de Na+ (hepes, glicose, CaCl2, MgCl2, KCl, NaCl)
1 solução rica em K+ (hepes, glicose, CaCl2, MgCl2, KCl(grande quantidade), NaCl)
1 solução com EDTA (hepes, glicose, EDTA, MgCl2, KCl, NaCl)
1 solução de Li+ (hepes, glicose, CaCl2, MgCl2, KCl, Lítio)

O experimento ocorreu da seguinte forma: Primeiramente foram extraídas as quatro retinas, logo em seguida elas foram colocadas em poços separados de uma placa de cultura de células. Feito isso, todas as retinas receberam três banhos de Hank de Na+ gelado com duração de 10 minutos cada. Em seguida elas foram incubadas por 10 minutos com glutamato a 50 µM. Após a retirada do glutamato, foram repetidas as três lavagens com Na+ gelado de 10 minutos cada lavagem. Completados os passos anteriores, cada retina foi incubada com um dos 4 tipos de soluções anteriormente citadas por 10 minutos, decorrido tal tempo, apenas o sobrenadante de cada amostra foi coletado, para ser feita a quantificação de glutamato liberado no HPLC.

3-Resultado:
Após a quantificação de glutamato liberado pela retina em cada solução, obteve-se o seguinte resultado:

Solução de Na+(controle): 4526 u.m.
Solução rica em K+: 5541 u.m.
Solução EDTA: 3024 u.m.
Solução de Li+: 3254 u.m.

4-Conclusão: Solução rica em K+: Aqui foi onde se percebeu a maior liberação de glutamato, isto aconteceu pois a grande quantidade de K+ que entrou na célula, somado ao influxo de Na+ da despolarização, criou um potencial de ação mais forte que o comum, atingindo uma ddp positiva acima do normal de +55mV.