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1. INTRODUÇÃOO cálcio é um elemento imprescindível na regulação corporal, atuando ativamente como mediador de diversas reações como cofator da proteína G trimérica, em canais iônicos transmembrana, na atuação da fosforilase (responsável pela quebra do glicogênio), na foto transdução, em caráter homeostático, como mensageiro transmembrana entre os mais variados campos participativos. Os animais, como o homem, conservar reservas cavalares de cálcio, destacando-se nos ossos e na arcada dentaria. Outra importante reserva de cálcio encontra-se no plasma sanguíneo. Ao nível das células, o cálcio fica armazenado no reticulo endoplasmático.
2. OBJETIVO
Identificar a dosagem do nível sérico de cálcio no soro humano pelo método de espectrofotometria.
3. MATERIAIS E MÉTODOS
3.1) Materiais Utilizados:
Reagentes
Tubos de ensaio (sangue, soro, teste, padrão)
EPI’S (jaleco, luvas, máscara)
Seringa e agulhas
Algodão, álcool e garrote
Centrifuga
Espectrofotômetro
Cronometro
Pipeta
Ponteiras para pipeta
3.2) Reagentes Utilizados:
1 – R1
4. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Realizamos a coleta de uma amostra de sangue correspondente a 3 ml, logo após mantivemos ao Banho Maria por 10’/37º, ocorreu a centrifugação por 5’/3000 RDM para obter o soro.
4.1- Utilizamos 3 tubos de ensaio que foram nomeados de B (Branco), P (Padrão) e A (Amostra).
4.2- Obtivemos o Soro e realizamos a Pipetação. Tudo foi preparado da seguinte forma: B P A
R1
2 ml 2 ml 2 ml
Padrão
_____ 20 ul _____
Soro
_____ _____ 20ul
4.3- Homogeneizamos e deixamos no Banho Maria por 10 minutos em temperatura ambiente
4.4- Levamos ao espectrofotômetro para ser realizada a leitura
Aparelho: Espectrofotômetro
Função: Absorbância
Comprimento de Onda: 620 mm
5. RESULTADOS E DISCUSSÃO
Após medirmos a absorbância das amostras no espectrofotômetro foram obtidos os seguintes resultados:
▪ AMOSTRA: 0,459
▪ PADRÃO: 0,462
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