Radioimunoensaio
Unidade Acadêmica de Serra Talhada - UAST
Discentes: Natiane Silva
03 dezembro 2013
INTRODUÇÃO
1959 - Introduzido por Berson e Yalow – com o objetivo de medir a concentração de insulina no soro;
Primeira técnica imunológica padronizada capaz de detectar e quantificar substâncias da ordem de nano e picogramas;
Tornando-se possível determinar qualquer tipo de molécula biológica, desde que haja um recetor específico e que a molécula biológica possa ser marcada.
INTRODUÇÃO
O radioimunoensaio clássico baseia-se no princípio da ligação competitiva.
Quanto maior for o número de anticorpos
NÃO marcados no soro
menor será o número de anticorpos MARCADOS capazes de se ligar ao antigénio
Por esse motivo, a radioatividade medida será tanto mais baixa, quanto mais elevado for o título de anticorpos não marcados no soro.
INTRODUÇÃO
Um dos métodos mais sensíveis para a análise quantitativa das reações antigénio-anticorpo.
RIE DIRETO
Uma quantidade conhecida de anticorpos específicos, é colocada na fase sólida
Adiciona-se uma quantidade fixa e pequena de antigénio marcado
O antigénio, se presente no soro, compete com o antigénio radioactivo
(marcado) pelos locais de ligação nos anticorpos A amostra de soro a testar é então acrescentada Após um período de incubação, remove-se o antigénio não ligado e faz-se a medida da radioactividade da fase sólida A quantificação é feita num aparelho específico para a leitura de radioactividade; A concentração das moléculas antigénicas presentes na amostra é inversamente proporcional à leitura de radioactividade
RIE DE COMPETIÇÃO
É imobilizada uma quantidade fixa de antigénio num suporte sólido; Adiciona-se uma quantidade fixa de anticorpo marcado específico, misturado com a amostra em teste
Se a amostra for positiva, haverá formação do complexo ag/ac com