Questionário sobre rna

PERGUNTAS/PESQUISA

O que é RNAlater? Para que serve? Como deve ser usado?
É uma solução aquosa, não tóxica, usada para estabilizar e proteger a molécula de RNA em amostras de tecido, minimizando o processamento do mesmo e a necessidade de congelar para posterior processamento. Sua atividade inibe RNAses. Este Reagente deve ser usado em amostras frescas, que imediatamente após a coleta devem ficar imersas nessa solução.

Para Romper parede bacteriana deve se usar Lisozima. Como ela atua?
Ela hidrolisa ligações glicosídicas beta 1,4 entre resíduos do ácido N-acetilmurâmico e N-acetil-D-glucosamina de pepitioglicanos presentes na parede bacteriana.

Qual a Função do Fenol e do Clorofórmio?
O Trizol/Fenol Promove a manutenção da integridade do RNA enquanto degrada os outros componentes celulares, a adição do clorofórmio promove a separação das fases aquosas e orgânica, o pH ácido fará com que o DNA fique retido na fase orgânica, permitindo o isolamento específico de RNA na fase aquosa.

Qual a função do etanol e da baixa temperatura?
Promover a precipitação do RNA pela “manipulação” de ambiente hidrofílico/hidrofóbico.

Qual a composição e função do Brometo de Etídio?
O brometo de etídio ou Brometo de 3,8-diamino-5-etil-6-fenilfenatridínio, possui fórmula molecular: C21H20BrN3. Sua função é relacionada à visualização de bandas(amostras de ácidos nucléicos) em gel (eletroforese). Este é um intercalante que quando ligado à amostra de ácido nucleico e exposto à luz UV emite fluorescência de cor alaranjada.

Como interpretar um gel de RNA? O que se espera?

Espera-se duas bandas devido a grande quantidade de rRNA (RNA ribossômico), e este possui duas subunidades contendo RNA em cada uma de tamanhos distintos. Exemplo:

Disponível em: <http://www.mobio.com/soil-rna-isolation/rna-powersoil-total-rna-isolation-kit.html>

Na síntese de cDNA quais tipos de primers podem ser utilizados? Como eles funcionam?

Os tipos de primers são:
OligodT-