Provas bioquímicas

Aula Prática n.º 4
Métodos de identificação e caracterização: principais provas bioquímicas; sistemas automatizados. Outros métodos de identificação e caracterização de isolados: métodos imunológicos e de biologia molecular.

CULTURA DE MICRORGANISMOS - PROVAS BIOQUÍMICAS

• Conhecer princípios e procedimentos de diversas provas bioquímicas usadas na identificação de microrganismos.
• Analisar as provas bioquímicas realizadas (leituras directas e indirectas).

TEXTO DE APOIO:

• Provas fermentativas
• Prova ONPG
• Prova de Kligler (agar Kligler) ou agar Triple Sugar Iron (TSI)
• Hidrólise do amido

• Prova do sulfureto de hidrogénio (H2S)
• Hidrólise da gelatina
• Hidrólise da caseína
• Prova IMViC o Prova do indol o Prova do vermelho de metilo o Prova de Voges-Proskauer o Prova da utilização do citrato

• Descarboxilação da lisina
• Desaminação da fenilalanina
• Prova da redução dos nitratos
• Prova da urease
• Prova das oxídases
• Prova da catálase
• Prova da coagulase

ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DOS MICRORGANISMOS

Os microrganismos efectuam as suas variadas actividades bioquímicas utilizando nutrientes obtidos a partir do ambiente que os rodeia. Essas reacções bioquímicas que ocorrem dentro ou fora dos microrganismos são catalisadas por enzimas. No laboratório, é possível demonstrar algumas das actividades bioquímicas através da observação da capacidade dos microrganismos usarem enzimas para degradar hidratos de carbono, lipidos, proteínas e aminoácidos. Geralmente, a metabolização destas moléculas orgânicas origina produtos finais cuja detecção pode ajudar na caracterização e identificação dos microrganismos. HIDRATOS DE CARBONO

Provas fermentativas As fermentações são reacções bioquímicas produtoras de energia em que moléculas orgânicas servem como aceitadores e dadores de electrões. A capacidade dos microrganismos fermentarem hidratos de carbono e os tipos de produtos formados são úteis na sua identificação.