Provas bioquímicas de microbiologia

Provas bioquímicas

Fermentação da glicose, manitol e lactose: formação de ácidos e / ou gases.
Coletar, com alça, cultura de origem em meio líquido e inocular em:

• Tubo para teste de fermentação de glicose: contém tubo invertido (Durhan) no interior
• Tubo para teste de fermentação de manitol: tubo com marca azul
• Tubo para teste de fermentação de lactose: tubo com marca vermelha

Interpretação: virada do indicador para vermelho em pH ácido

Fermentação da glicose: ácida mista (prova do vermelho de metila) x butileno glicólica (prova Voges Proskauer)
VM: glicose  oxaloacetato, succinato, acetato, etanol
VP: Glicose  acetoína  butanodiol

Coletar, com alça, cultura de origem em meio líquido e inocular em meio de Clatk-Lubs (marca amarela)

Interpretação:
• Teste VM: depois do crescimento microbiano (48h), adicionar em um dos tubos 5 gotas de VM – o teste é positivo com aparecimento de coloração avermelhada (pH ~ 4.4).

• Teste VP: Adicionar no outro tubo 5 gotas do reativo de Barrit (solução A), agitar bem e e, seguida adicionar 5 gotas da solução B. Agitar e incubar por 30 minutos. Positivo: coloração vermelha.

Metabolismo respiratório x Metabolismo fermentativo (meio de Hugh-Leifson, semi-sólido)
Com AGULHA, coletar cultura de origem e inocular em 2 tubos até próximo ao fundo do tubo. Cobrir um dos meios com vaselina estéril (1 cm de altura). Azul de bromotimol: amarelo em pH ácido, verde em pH neutro, azul em pH básico.

Interpretação: Microrganismo facultativo: crescerá nos dois tubos, coloração amarela.
Metabolismo oxidativo: apenas no tubo sem vaselina.

Prova de utilização do citrato como única fonte de carbono.
Com a agulha, inocular em estria no meio citrato de Simmons.

Positivo: microrganismo utiliza citrato, produzindo ácido pirúvico e CO2.
CO2 – é complexado com água e sódio (presentes no meio) e alcaliniza o meio – coloração azul.

Hidrólise do amido: prova de produção de amilase
Com a alça, inocular