Procedimento operacional padrão - Teste a Antimicrobianos (Pop/TsA)

UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

FACULDADE DE CIÊNCIAS MÉDICAS

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA, IMUNOLOGIA E PARASITOLOGIA.

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO

TÍTULO: ANTIBIOGRAMA (DIFUSÃO EM DISCO)

POP NO. L02/01-12

AUTOR: Rafael Barros Lobato

REVISOR: Profª Robson Leão
DATA INÍCIO: 10/02/2014

DATA REVISÃO: 11/02/2014

RESUMO

Este documento descreve a metodologia para a fim de determinar o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos em diferentes bactérias.

1.0 MATERIAL BACTERIANO

1.1 Colônias puras de bactérias gram-positivas ou gram-negativas, provenientes de cultivo recente de 18 a 24 horas, isoladas a partir de meios de cultura não seletivos.

2.0 PRINCÍPIO DA TÉCNICA

2.1 O procedimento consiste no preparo de uma suspensão de bactérias de cultivo recente, suspensão na superfície de uma placa de Agar Mueller Hinton, e adição dos discos com antimicrobianos; 2.2 Após a incubação em estufa, é analisado o padrão de crescimento ou inibição ao redor de cada disco de antimicrobiano, sendo então medido o tamanho de cada halo e o resultado pesquisado em tabelas apropriadas segundo a espécie bacteriana em análise (normalmente documento do CLSI do ano corrente);

2.3 Cada disco apresenta uma concentração padronizada impresso em uma de suas faces com seu código e o valor numérico de sua concentração. As combinações disponíveis foram estabelecidas de forma a aproximar aos critérios de escolha do CLSI;

3.0 MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS

3.1 Estufa bacteriológica; Alças bacteriológicas; Agar Mueller Hilton em placas 90x15mm (para 5 discos) e de 140x15mm (para até 12 discos); Tubo padrão com escala 0,5 Mac Farland; Solução salina (NaCl 0,85%); Swabs estéreis para espalhamento da suspensão; Tabelas com os valores esperados de halos inibitórios (CLSI, EUCAST).

4.0 PROCEDIMENTOS TÉCNICOS

4.1 Com uma alça bacteriológica devidamente flambada e resfriada, tocar na colônia