preparo de laminas permanentes
II-OBJETIVOS:
Aprender a montar laminas permanentes, vizando seguir todos os passos com muito cuidado e atenção para que a lamina possa ter qualidade para a vizualização.
III-MATERIAIS E METODOS:
MATERIAIS:
-Material Biologico: Celulas da mucosa bucal
-Lamina
-Laminula
-fixador de Bouin
-Corantes: Hematoxilina e Eosina
-Alcool : 90%, 95% e 100%
-Xilol
-Resina
METODOS:
-Retirar as celulas da mucosa bucal forçando a buchecha para dentro com auxilio de um palito e fazer a raspagem formando um angulo de 45º, rapidamente fazer um esfregaço em lamina limpa deslizando em uma só direção de maneira que o material se espalhe e não se sobreponha.
-Apos o esfregaço, colocar em barquinhas antes que o material seque totalmente e mergulha-las em alcool 90% por 5 minutos.
-Lavar com agua destilada.
-Mergulhar em Hematoxilina por exatamente 5 minutos.
-Lavar com agua da torneira para retirar o excesso do corante presente.
-Corar com Eosina, por 3 minutos.
-Lavar ligeiramente com agua destilada.
-Desidratação: Passar o material por uma seção de alcoois:
Alcool 90%: 2 minutos
Alcool 95%: 2 minutos
Alcool 100% I: 2 minutos
Alcool 100% II: 2 minutos
-Diafanização: Passar por Xilol
Xilol I: 2 minutos
Xilol II: 2 minutos
-Retirar as laminas do xilol e rapidamente pingar uma gota de resina sobre o material. Cubrir com a laminula limpa evitando que se forme bolhas.
-Deixar em estufa a 37ºC, por alguns dias.
-Depois de seca, limpe a lamina e