Preparo de lamina

Preparações definitivas
Embora seja possível o estudo microscópico de células vivas, muitas vezes há vantagem em obter uma preparação definitiva, na qual as células fiquem preservadas, isto é, fixadas e coradas para melhor demonstração dos seus componentes, permitindo posteriores observações.
O material biológico tem, por isso, de ser submetido a diversas operações que permitam que não se decomponha. Uma preparação definitiva ideal deveria mostrar as células com a mesma estrutura microscópica e composição química que possuíam quando vivas. Isto, porém, não é possível, e todos os preparados citológicos apresentam artefactos produzidos pelas técnicas utilizadas.
Um artefacto da técnica é um objecto ou defeito produzido artificialmente, isto é, é produzido pelas técnicas usadas. É algo artificial que não existe na natureza.
Vantagens e desvantagens do uso de preparações definitivas
Vantagens |Desvantagens |
Duração longa – permite posteriores observações. |O material biológico observado tem de ser morto. |
Permite observação no microscópio electrónico. |Há um maior risco de produzir artefactos devido aos procedimentos utilizados. |
Etapas de realização de preparações temporárias
|1. Colheita - Obtenção do material que se pretende observar| çã|2. Fixação - Paragem rápida de toda a actividade vital, estabilizando a estrutura. Tem como objectivos conservar o mais possível a estrutura que se apresentam enquanto viva, impedindo a acção das enzimas autolíticas. São utilizados fixadores como o álcool, ácido acético, ácido ósmico, mistura de álcool e éter em partes iguais, líquido de Carnoy e líquido de Bouin (fixador universal). Esta etapa também pode ser conseguida através de agentes físicos: por congelação, embebendo a peça num banho frio (por exemplo, azoto líquido de –160 a –190ºC). Seguidamente procede-se à remoção dos cristais de gelo, introduzindo a peça no vácuo a temperaturas baixas. No vácuo o gelo sublima e o vapor de água é removido.|
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