preparo de amostra Microscopia eletronica de transmissão para biologia

TIPO DE FIXADORES.
Fixadores físicos: utilizam agentes físicos (temperatura)
Fixadores químicos: utilizam compostos químicos com propriedade de preservação. Fixadores não denaturantes de proteínas: aldeídos
(formaldeído; glutaraldeído; glioxal; acroleína)
Fixadores denaturantes de proteínas: alcoois (metanol,etanol.
Propanol, ácido acético).
Fixadores oxidantes: tetróxido de ósmio; permanganato de potássio; dicromato de potássio.
Fixadores de mecanismos desconhecidos: cloreto de mercúrio; ácido pícrico.
PROPRIEDADES DE UMA BOA FIXAÇÃO
1. Preservar o material biológico de tal forma a deixá-lo o mais próximo possível de quando estava “in vivo”.
2. Impedir a autólise (autodegradação – lisossomos).
3. Evitar a proliferação de microorganismos (bactérias e fungos).
4. Tornar o material biológico mais resistente a tratamentos e manipulações posteriores (cortes, inclusões, hidratações e desidratações...). 5. Preparar ou aumentar a afinidade para determinados corantes.

COLORAÇÃO
Criar ou acentuar contrastes.
“Corantes básicos”: são compostos químicos que tem afinidade por estruturas biológicas/celulares ácidas ou basófilas, como o núcleo.
Exemplos: hematoxilina; azul de metileno; violeta de genciana; azul de toluidina; orceína; fucsina básica etc...
“Corantes ácidos”: são compostos químicos que tem afinidade por estruturas biológicas/celulares básicas ou acidófilas. O citoplasma é, de um modo geral, menos ácido que o núcleo, mas contem uma mistura variável de estruturas básicas e ácidas.
Exemplos: eosina; fucsina ácida; eritrosina, orange G; vermelho congo...
“Corantes neutros”: são misturas ou soluções contendo corantes ácidos e básicos:.
Exemplos: soluções de Leishman, Giemsa, Wright.
Corantes vitais: são corantes que são “suportados” pela célula, sem provocar sua morte:.
Exemplos: verde janus (mitocondria), azul de metileno (núcleo), vermelho neutro (vácuolos digestivos) etc...
Coloração ortocromática: quando o corante empregado