planta industrial ácido cítrico
O meio de crescimento para a cultura de semente continha: 50 g de glicerol, 2 g de extracto de levedura, 3 g de Bacto-peptona (Difco, EUA) em 1 litro de água da torneira. Uma cultura de sementes foi cultivado num balão de 300 ml (contendo 100 ml de meio de crescimento), num agitador a 30 ° C durante 2 dias. Um inoculo de 200 ml foi introduzida no fermentador, contendo 1,8 litros do meio de produção.
Regimes de lote e RB foram realizadas num frasco de 5-L fermentador (Biostat B Além disso, Sartorius, Alemanha) com um volume de trabalho de 2 litros a 30 ° C. A taxa de aeração foi fixada em 0,6 l min-1 . A velocidade do agitador foi ajustada a 800 rpm, e a concentração de oxigénio dissolvido foi mantido a 25 ± 5% de saturação. O pH foi mantido automaticamente em 5,5 pela adição de NaOH (40% w / v).
Modo de carga foi conduzida num meio consistindo 125I gl-1 de glicerol em bruto, 3 gl-1 NH4CI, 1 gl-1 de MgSO4 x 7H2O, 0,2 gl-1 KH2 PO4 e 1 gl-1 de extracto de levedura. Após 24 e 60 h de cultivo, o glicerol em bruto (62,5 gl-1) foi adicionado até uma concentração total de 250 gl-1
Médio de produção para o cultivo RB continha: 250 glicerol gl-1crude, 3 gl-1 NH4CI, 1 gl-1 de MgSO4 x 7H2O, 0,2 gl-1 KH2 PO4 e 1 gl-1 de extracto de levedura. Para a primeira 75 h, a cultura foi realizada em modo de lotes, em seguida, uma porção do líquido de cultura (0,8, 0,6, ou 0,4 l) foi retirado, e o mesmo volume de meio de produção foi substituída adicionado. Este procedimento foi repetido quatro vezes para cada volume. O