Pesquisa atividade experimental
8
DNA
1. Extração
ORIENTAÇÃO PARA O PROFESSOR
RECOMENDAÇÕES
• Os alunos deverão responder a questão prévia individualmente e por escrito antes de iniciar a atividade. No final, o professor deverá discutir novamente a questão com os alunos;
• Comentar com seus alunos que o procedimento para extração do DNA em células animais é basicamente o mesmo;
• A totalidade do DNA extraído será composta por várias réplicas das mesmas moléculas, uma vez que inúmeras células do mesmo organismo serão degradadas para que possamos visualizar o DNA;
• Chamar a atenção dos alunos para o fato de que a estrutura de dupla hélice do DNA só pode ser visualizada de modo indireto e por meio de metodologias sofisticadas. O que será observado ao final do experimento são milhares de fitas de DNA juntas.
OBJETIVOS
• Conhecer como se dá o procedimento de extração do DNA;
• Identificar o local onde o DNA é encontrado;
• Visualizar um aglomerado de fitas de DNA.
OBSERVAÇÕES
Explicação do procedimento e da utilização dos reagentes utilizados no experimento.
Maceramento
A cebola (morango ou banana) deve ser macerada para que a parede celular (estrutura espessa e rígida presente em células vegetais) seja rompida. A aplicação de força mecânica pode também romper a membrana celular de algumas poucas células, embora esta estrutura deva ser desestruturada quimicamente, conforme explicado no próximo item. Além disso, o maceramento dissocia os tecidos, permitindo que a solução de lise (detergente + sal) aja sobre um número maior de células, liberando um grande número de moléculas de DNA. Assim, a cebola (morango ou banana) deve ser muito bem macerada para garantir um bom rendimento do experimento.
Peneirar
Peneirando o material é possível separar restos de estruturas celulares da solução contendo
DNA de outras moléculas.
Detergente
As membranas plasmática e nuclear são compostas principalmente por lipídios. A função do detergente é desestruturar as