oloração de Gram

Coloração de Gram

A coloração de Gram é um método criado pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram. É uma técnica que consiste na coloração de amostras para observação no microscópio, utilizada para colorir microorganismos diferentes com base na composição química e integridade da sua parede celular. De acordo com a cor que adquirem, são classificados em gram-positivos (roxo) ou gram-negativos (vermelho). Foi descoberto pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram. Teve por objetivos determinar e interpretar o mecanismo de reação de Gram, como uma forma de coloração diferencial.
Essa técnica consiste em um tratamento da amostra, em meio liquido ou sólido, com um corante primário, o cristal violeta, seguido de tratamento com um fixador, o lugol. O corante é absorvido tanto pelas bactérias Gram-positivas, quanto Gram-negativas vem de maneira idêntica o corante primário e o fixador, adquirindo uma coloração violeta devido à formação de um complexo cristal violeta-iodo, insolúvel, em seus citoplasmas. Segue-se um tratamento com um solvente orgânico, o etanol-acetona. O solvente dissolve a porção lipídica das membranas externas das bactérias Gram-negativas e o complexo cristal violeta-iodo é removido, descorando as células. Por outro lado, o solvente desidrata as espessas paredes celulares das bactérias Gram-positivas e provoca a contração dos poros do peptideoglicano, tornando-as impermeáveis ao complexo; o corante primário é retido e as células permanecem coradas. Em seguida, a amostra é tratada com um corante secundário, a fucsina básica. Ao microscópio, as células Gram-positivas aparecerão coradas em violeta escuro e as Gram-negativas em vermelho.
A importância da coloração de Gram esta na distinção de bactérias como Gram- positivas e Gram-negativas, as formas de cocos, bacilos; a maneira como formam colônias, as leveduras.
Os materiais utilizados na coloração são as placas de Petri, lâminas, cadinho e pistilo, vidro de relógio, frasco