Nefelometria e turbidimetria
1. Princípio do Método
São técnicas analíticas utilizadas para medir a luz dispersa uma vez que a dispersão da luz é um fenômeno físico resultante da interação da luz com partículas em solução. Esse fenômeno de espalhamento só ocorre quando se tem partículas de dimensões inferiores a 1 – 1,5 vezes o comprimento de da radiação utilizada, pois caso seja maior irá ocorrer a reflexão do feixe de luz.
A dispersão da luz ocorre quando a energia radiante ao colidir elasticamente com uma molécula espalha a luz em diversas direções, conforme observado na figura abaixo:
Alguns fatores como tamanho da partícula, comprimento de onda, distância de observação, efeito de polarização da luz incidente, concentração das partículas e a massa molar das partículas influenciam na dispersão da luz.
Turbidimetria: a turbidez ocasiona a diminuição do feixe de luz incidente, enquanto este passa por uma solução contendo partículas. A turbidimetria é a medida desta diminuição de intensidade.
Nefelometria: detecção de energia da luz dispersa ou refletida em direção a um detector que não se encontra na trajetória direta da luz transmitida. Estes detectores estão normalmente a 90°.
2. Aplicação
São métodos utilizados para a quantificação de proteínas séricas.
Nefelômetros projetados para medir a luz dispersa em ângulos diferentes de 90° podem ser utilizados para identificação e quantificação de complexos imunes (partículas maiores).
A nefelometria é usada para medir as concentrações de Ig A, Ig M e Ig G e outras proteínas plasmáticas de uma amostra. Também é utilizada como método de referência para a pesquisa de fator reumatóide.
3. Caracterização de parâmetros analíticos
A turbidimetria abrange uma faixa mais larga de concentrações, mas apresenta sensibilidade para baixas concentrações da amostra, uma vez que é difícil detectar uma pequena atenuação do feixe de radiação incidente causada por baixas concentrações. É indicado