lactose

Universidade Metodista de Piracicaba – UNIMEP

Faculdade de Engenharia e Arquitetura- FEAU – SBO

Curso: Engenharia de Alimentos
Matéria: Bioquímica II

Determinação de Teor de Lactose no Leite

Santa Bárbara d´Oeste
Setembro/2014
1. INTRODUÇÃO

2. OBJETIVO Quantificar o teor de lactose em amostra de leite pelo método de Somogy - Nelson.
3. PROCEDIMENTOS
Numere tubos de ensaio de acordo com o indicado na tabela.
Faça as adições de acordo com a tabela.
TUBO
(No)
ÁGUA
(mL)
Lactose
(mL)
Conc. (g/mL)
Somogy (mL)
Banho
Maria

10
(min)

Nelson (mL)
ÁGUA
(mL)
Absorbância
 = 540 nm
0
1,0
0,0

1,0

1,0
7 mL

1
0,8
0,2

1,0

1,0
7 mL

2
0,6
0,4

1,0

1,0
7 mL

3
0,4
0,6

1,0

1,0
7 mL

4
0,2
0,8

1,0

1,0
7 mL

5
0,0
1,0

1,0

1,0
7 mL

Padrão de lactose: Dissolver 0,100 g de lactose pura em 1 litro de água. Esta solução conterá 100 g/ml. Fazer leitura em espectrofotômetro em 540 nm.
Preparo das amostras de leite Cada grupo receberá 2 amostras de leite: uma armazenada em geladeira e outra mantida à temperatura ambiente.
a) Transferir 1,0 mL (com pipeta volumétrica) da amostra de leite para balão volumétrico de 100 mL e completar o volume com água destilada. Agitar bem.
b) Transferir 1,0 mL (com pipeta volumétrica) da solução diluída de leite para tubo de centrífuga. Efetuar a remoção dos interferentes pela adicão de 1,0 mL de ZnS04 a 5% (agitar) e acrescentar 1,0 mL de hidróxido de bário 0,3mol/L. Agitar. Completar a 10 mL adicionado 7 mL de água destilada. Agitar. Centrifugar a 300 x g durante 5 minutos (3.000 rpm).
Determinação do teor de lactose no leite Determinar os teores de lactose nas duas amostras de leite, preparando as amostras como segue na tabela abaixo:

TUBO

Volume (mL)
Somogy (mL)
BM (min)
Nelson (mL)
ÀGUA (mL)
Absorbância
Concentração (g/mL)
Leite Ambiente
1.0
1.0
10
1.0
7