ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS

Disciplina Microbiologia (CBI e CBN)UNESP/Rio ClaroPERODO 2 semestre de 2012HORRIO 8h00-12h00 19h00-23h00 DURAO 60 hAula Prtica N2 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS Professores Fernandos C. Pagnocca (Turma 1) Lara D. Sette (Turma 2) Tcnicas de isolamento de bactrias e fungos em meios de cultura Amostras contendo micro-organismos quando cultivadas em meios de cultura que possuam os requisitos nutritivos e em condies ambientais favorveis, propiciam o incio do desenvolvimento destes micro-organismos no meio especificado. Em microbiologia, h varias tcnicas de isolamento de micro-organismos, algumas so utilizadas para recuperao de micro-organismos a partir de amostras de solo e sedimentos, outras de amostras de gua, rios e lagos ou de amostras de animais, plantas, superfcies, entre outras. Principais tcnicas de isolamento de micro-organismos tratamento da amostra Fragmentos da amostra em pedaos este procedimento muito utilizado para isolamento de micro-organismos que crescem no interior de substratos como frutas, folhas, invertebrados, entre outros. Neste mtodo a amostra esterilizada em sua superfcie externa, fragmentada em pedaos e colocada nas placas de Petri contendo meio de cultura solidificado (Figura 1). Figura 1. Isolamento por meio de fragmentao da amostra em pedaos e inoculao direta no meio de cultura (slido). Homogeneizao e diluio seriada da amostra esta tcnica bastante til para a recuperao de micro-organismos presentes em solos e sedimentos, bem como outros substratos similares. Para cada 1g de amostra adicionado 9,0 mL de soluo salina de 0.9 (p/v) NaCl (diluio 10-1) e a amostra hidratada em seguida colocada sob agitao por cerca de 10 minutos. Aps esse perodo, uma alquota de 1,0 mL da amostra retirada e transferida para 9,0 mL de soluo salina (diluio 10-2). Este procedimento repetido sucessivamente, visando obteno de diferentes diluies (10-3, 10-4, 10-5, 10-6, 10-7), as quais sero inoculadas nos meios de cultivo