imunoflorescencia

IMUNOFLUORESCÊNCIA
Permite a detecção e localização de antígenos em células e tecidos utilizando antígenos específicos que são marcados com fluorocromos.
Podemos detectar e localizar anticorpos com seus antígenos específicos.
CARACTERÍSTICAS
Os anticorpos conseguem se ligar com o fluorocromo covalentemente sem perder sua capacidade de se ligar ao seu antígeno.
O teste pode ser qualitativo(avalia a qualidade) ou semi-quantitativo(avalia a qualidade, mas como isso é difícil, semi).
A imunofluorescência é um método de alta sensibilidade e especificidade.
FLUOROCROMOS
Absorvem a luz ultravioleta e emitem luz visível, ou seja, da p ver fluorescente.
Os mais utilizados são o isotionato de fluoresceína e compostos de rodamina para conjugação do anticorpo.
Usa-se o microscópio de epifluorescência .
REAÇÃO DIRETA
Conjugado – anticorpo específico marcado com o fluorocromo. O Conjugado se liga ao antígeno e forma um imunocomplexo estável. Microscópio de fluorescência , não sai na lavagem pq é estável.
Vantagens -> alta especificidade e sensibilidade, possibilita a detecção de ptns intracelulares e sua localização.
Desvantagens - >alto custo do microscópio de fluorescência , um conjugado para cada antígeno que se deseja identificar ou localizar. Subjetividade da leitura.
Aplicações -> detecção direta de microrganismos em secreções, urina, tecidos...tb utilizado pra detecção de células tumorais.
INDIRETA
IMUNOFLUORESCÊNCIA
Permite a detecção e localização de antígenos em células e tecidos utilizando antígenos específicos que são marcados com fluorocromos.
Podemos detectar e localizar anticorpos com seus antígenos específicos.
CARACTERÍSTICAS
Os anticorpos conseguem se ligar com o fluorocromo covalentemente sem perder sua capacidade de se ligar ao seu antígeno.
O teste pode ser qualitativo(avalia a qualidade) ou semi-quantitativo(avalia a qualidade, mas como isso é difícil, semi).
A imunofluorescência é um método de alta sensibilidade e