Identificação de bactérias

PROVA PRÁTICA DE MICROBIOLOGIA ESPECIAL
Identificação de Bactéria
Amostra 3

Materiais e Métodos

- Alça de semeadura
- Bico de Bunsen
- Lâminas
- Colônia – amostra 5
- Água destilada

Para coloração de Gram

- Solução cristal violeta
- Solução de lugol
- Álcool
- Solução de Fucsina básica

Observar no microscópio óptico com:

- Óleo de imersão

Teste da Catalase

- Peróxido de hidrogênio

Camp Test

-Amostra de Staphylococcus aureus

Métodos :

A. Preparação e fixação do ESFREGAÇO

B. Técnica de Coloração de Gram

1) Cobrir o esfregaço com solução CRISTAL VIOLETA, incubar por 1 minuto;
2) Lavar rapidamente em água corrente;
3) Cobrir o esfregaço com solução LUGOL, incubar por 1 minuto;
4) Lavar rapidamente em água corrente;
5) Lavar álcool por 15 segundos. Interromper logo o efeito do álcool lavando com água;
6) Cobrir o esfregaço com solução de FUCSINA básica, incubar por 30 segundos;
7) Lavar novamente em água corrente;
8) Secar a lâmina, pressionando-a levemente entre duas folhas de papel de filtro, com o cuidado para não remover o esfregaço corado;
9) Observar ao microscópio com objetiva de imersão (objetiva 100X).

Resultados e Interpretação

Após a fixação da amostra na lâmina, realização do teste de Gram e observação no microscópio constatamos tratar-se de uma amostra Gram + , sugerindo ser Staphylococcus ou Streptococcus.

Para a diferenciação básica e confirmatória entre os gêneros Staphylococcus e Streptococcus utilizou-se a prova da catalase. A catalase é uma enzima produzida pelos Staphylococcus e não produzida pelos Streptococcus. Esta enzima desdobra o peróxido de hidrogênio (água oxigenada) em água e oxigênio livre e sua prova positiva pode ser facilmente verificada pela simples visualização de bolhas que são formadas quando se adiciona água oxigenada à cultura. Resultado Negativo.

Uma vez diante de bactérias do gênero Streptococcuss,