identificação da massa molecular de proteínas

Identificação da Massa Molecular de Proteínas por SDS-PAGE
Instituto Superior de Ciências da Saúde Egas Moniz
Campus Universitário, Quinta da Granja - 2829 - 511 Caparica, Monte de Caparica
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Ciências Forenses e Criminais
Bioquímica
Docente: Mestre Rita Soeiro
Discente: Carmen Barrocal , nº110104
Realização de a atividade: 07 de abril de 2014
Entrega do relatório: 21 de abril de 2014

Objetivo do trabalho:
Identificação de uma molécula através da comparação da sua massa molecular com a massa molecular presente num marcador.

Resumo:
Com o intuito de identificar a molécula em questão, foi utilizada a eletroforese em gel SDS, sendo que este emprega o gel como suporte e a corrente elétrica como indutor da separação.
Através do comportamento da proteína ira-se então proceder à sua identificação.

Detalhes Técnicos:
As proteínas são as macromoléculas mais abundantes nos sistemas biológicos. Estas realizam a maior parte dos processos nas células, desde catalisar reações metabólicas a servirem como elementos estruturais das células.
As proteínas normalmente são carregadas eletricamente (positiva ou negativas). Aplicando nestas um campo elétrico, faz com que as proteínas migrem a uma determinada velocidade dependendo da sua carga líquida, do seu tamanho e da sua forma.
A eletroforese em gel de poliacrilamida – SDS, usando gel de poliacrilamida com ligações cruzadas, forma uma matriz inerte (peneira molecular) pela qual as proteínas migram. A utilização de um detergente SDS (detergente aniónico), que confere a carga global negativa à proteína e se liga a regiões hidrofóbicas das moléculas proteicas, vai desnaturar e dissociar estruturas quaternárias em monómeros.
Assim, o processo irá desencadear-se da seguinte forma: cada molécula de proteína ligar-se-á a um grande número de moléculas do detergente (carregadas negativamente), esta supera a carga interna da proteína e faz com que ela migre em direção à carga