fisiologia vegetal

Trabalho nº 3 – Separação de pigmentos foliares por cromatografia em coluna

Introdução:
Cromatografia é uma técnica na qual os componentes de uma mistura são separados com base nas diferenças de velocidade nas quais são transportados através de uma fase fixa estacionária por uma fase móvel líquida ou gasosa.
A cromatografia é, um método físico-químico de separação, fundamentada na passagem dos componentes de uma mistura por duas fases imiscíveis, a fixa e a estacionária, e que possuem diferentes interações entre si. Como existe uma grande variabilidade de combinações entre fase móvel e estacionária, a cromatografia se torna uma das técnicas mais diferenciadas. A cromatografia possui diferentes classificações, mas nesta experiencia foi utilizado o método seguinte:
Em Coluna:
a) Líquida
Clássica: Eluição por força gravitacional
Liquida de alta eficiência: Fase estacionaria com partículasmuito pequenas. Necessidade de uso de bomba de alta pressão para forçar eluição
b) Cromatografia supercrítica: usa-se vapor pressurizado acima da sua temperatura crítica
c) Gasosa: a fase móvel é um gás inerte e a fixa pode ser um liquidoou sólido
A cromatografia Industrialmente, tem grande aplicação como por ex.
Purificação de compostos
Análise simultânea de adoçantes (aspartame e sacarina) e conservantes (ácido ascórbico e ácido benzóico).
Análise de EDTA que é usado como antioxidante.
Análise de anti-bactericidas e conservantes de carne

Material:
Espinafres
Toalhetes de papel
Almofariz
Balança
Éter de Petróleo
Acetona
Matraz
Funil
Papel de filtro
Algodão
Areia
Oxido de alumínio
Gobelé
Procedimentos
1. Secou-se os espinafres com toalhetes de papel
2. Pesou-se 5g de espinafres e triturou-se num almofariz com 10 ml de uma mistura de éter de petróleo 40-60º / acetona 4:1 (v/v)
3.
4. Decantou-se a solução para 1 matraz (100ml) e repetiu-se a extração duas vezes (2 x 10ml).
5. Juntou-se os extratos orgânicos e procedeu-se