Fisico-quimica

DNA Fingerprinting

Escola secundária c/3ºciclo do Agrupamento de Escolas de Miraflores
Biologia e Geologia; Professora Ana Sales
Realizado por:
Bruno Machado
Luís Almeida
Miguel Domingues
Weerasit Chaichuangchok
30 de Janeiro de 2013

Índice

Introdução
O presente trabalho teve por objectivo a realização de uma técnica que permite a comparação das moléculas de DNA de indivíduos diferentes designada DNA Fingerprinting.
Esta técnica, frequentemente utilizada em genética forense, permite a separação de fragmentos de DNA através da utilização de enzimas de restrição que seccionam esta molécula em zonas específicas. Seguidamente, por acção de uma corrente eléctrica, gerada por uma DDP, é possível sequenciar os fragmentos de DNA seccionados e tirar conclusões quanto ao seu grau de semelhança entre diferentes indivíduos.
Na tarefa realizada pretendeu-se identificar o culpado de um crime por comparação do DNA de 5 suspeitos com o DNA do criminoso.

Material * Kit de Electroforese * Seis Amostras de DNA (cinco pertencente aos suspeitos e um ao culpado); * Enzimas de Restrição (EcoR1, Pst1) * Micropipetas (20 μL); * Pipeta; * Substância Tampão (TAE) * Agarose (em pó) * Eppendorfs * Balança Digital * Incubadora * Balão de Erlenmeier * Proveta * Vareta * Manta de Aquecimento * Luvas de Látex * Gel Red * Loading Dye * Fonte de corrente eléctrica

Protocolo 1. Com o auxílio de uma micropipeta de 20 μL pipetaram-se 10 μL de DNA para um eppendorf, repetindo-se o procedimento para as outras cinco amostras de DNA; 2. Novamente, com a micropipeta colocaram-se 10 μL de mix de reacção contendo enzimas de restrição em cada um dos eppendorfs com as diferentes amostras de DNA; 3. De seguida colocaram-se os eppendorfs em incubação durante 20 minutos, a uma temperatura de 37ºC; 4. Mediram-se 50 mL da solução de tampão TAE com o auxílio de uma proveta e 0,4 g de pó de agarose,