Extração e separação dos pigmentos do espinafre

Extração e Separação dos Pigmentos do Espinafre

O espinafre, assim como outros vegetais escuros, possui como principais pigmentos o B-caroteno e as clorofilas, que apresentam, respectivamente, as cores amarelo e verde. Para separar os dois pigmentos do extrato do espinafre pode ser realizada a técnica de cromatografia.
A cromatografia é uma técnica físico-química de separação de componentes de uma amostra, possuindo uma fase que é fixa, chamada de fase estacionária, e outra livre, que percorre o sistema, chamada de fase móvel. A cromatografia pode ser realizada em coluna, em papel ou em camada delgada.
Na separação dos pigmentos do espinafre foram realizadas a cromatografia em coluna e em papel.
Na técnica realizada em coluna, foi utilizado açúcar comercial como fase estacionária e, como fase móvel, utilizou-se removedor de gorduras (constituído por uma mistura de hidrocarbonetos). O extrato do espinafre foi adicionado ao sistema e, passando pela coluna o removedor de gorduras, foi possível separar o pigmento amarelo (B-caroteno), uma vez que por ser um composto apolar, apresentou maior afinidade pelo removedor que a clorofila, que ficou retida na coluna (mostrar imagem do banner).
Na cromatografia em papel, um gota do extrato de espinafre é colocada em um papel de filtro e este tem sua extremidade mergulhada em um Becker com removedor de gorduras (realizar procedimento neste momento). Após algum tempo, é possível observar que o removedor sobe pelo papel filtro arrastando consigo o pigmento amarelo (B-caroteno) uma vez que, ambos sendo apolares, apresentam maior afinidade entre si (mostrar imagem do banner e o papel que foi usado no procedimento). Por outro lado, se for utilizado um solvente menos apolar, como acetona ou álcool, é possível observar que o solvente arrasta consigo o pigmento verde, ou seja, a clorofila. (pode ser feito esse procedimento em um momento anterior e deixar guardado o papel para apenas mostrar como ficou quando foi utilizado