Extração e Identificação de RNA e DNA em banana

Bioquímica I
Prática
EXTRAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DOS ÁCIDOS
NUCLEICOS

Docentes
José Roberto Ernandes
Sandra Regina Pombeiro Sponchiado

 Objetivos
Extrair e identificar qualitativamente os ácidos nucleicos presentes na banana

 Resultados e discussões


Etapas envolvidas na extração de ácidos nucleicos

1. Colocar meia banana maça em um almofariz e macerar muito bem sob banho de gelo; O processo de maceração permite o rompimento da parede celular e de membranas celulares que mantém os ácidos nucleicos na estrutura.
2. Transferir o macerado para um béquer e adicionar no almofariz 50 mL de uma solução extratora (preparada com citrato de sódio 0,015 mol/L) contendo 5% de dodecisulfato de sódio, NaCl 0,15 mol/L e EDTA 0,001 mol/L) e depois verter o béquer. O citrato de sódio forma um tampão, o qual é importante para manter a integridade das células e que as mesmas não sofram processo de lise ou murchem pela diferença de salinidade entre seu interior e a solução.
O NaCl contribui com íons positivos que neutralizam a carga negativa do DNA e são de fundamental importância por ajudar a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído, além A adição de sal no início da experiência proporciona ao DNA e a o RNA um ambiente favorável, aumentando a densidade do meio que facilita a migração do
DNA e do RNA para o álcool que será posteriormente adicionado.
O dodecilsulfato de sódio é um detergente, reagindo com os lipídeos presentes na membrana celular e na membrana nuclear, quebrando a mesma e deixando o conteúdo do núcleo e do citoplasma das células disperso em solução.
O EDTA funciona como agente quelante utilizado para se complexar com os metais que passaram a existir em solução com a lise das membranas celular e nuclear, inibindo a ativação das proteases, as quais iriam ocasionar a perda dos ácidos nucléicos extraídos.
A função de algumas dessas proteínas seria manter o DNA enrolado numa espiral muito apertada. 3.