Extração de Pigmentos Foliares e Separação de Pigmentos por Cromatografia em Papel

UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ
CENTRO DE CIÊNCIAS
CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: BIOQUÍMICA GERAL
PROFESSORA: CRISTINA PAIVA

Extração de Pigmentos Foliares e Separação de Pigmentos por Cromatografia em Papel

ALUNOS:
Pedro Arruda
Cíntia Martins
Ricardo Paulino
Lucas Santiago
Maria Virgínia
Hugo Pereira
Heitor Miranda
Yago Barros

FORTALEZA 2014
Introdução
Os pigmentos dos cloroplastos localizam-se nos tilacóides. Suas principais funções são a absorção da energia radiante e a transferência dessa energia a uma série de compostos oxirredutíveis os quais permitem a formação de O2, ATP e NADPH+H+ importantes para as fases das reações fotoquímicas e bioquímicas da fotossíntese. O pigmento que participa diretamente das transferências de elétrons é apenas a clorofila a, enquanto a clorofila b e os carotenóides têm uma atuação indireta, transferindo a energia luminosa á clorofila a. Cada tipo de pigmento tem uma estrutura química definida que determina sua coloração. Assim, a clorofila a é verde azulada, a clorofila b é verde-amarela, as xantofilas são amarelas e os carotenos são alaranjados. Uma técnica extremamente simples que permite a separação destes pigmentos, e que foi usada na prática, é a cromatografia em papel.

Metodologia
Com o intuito de se extrair clorofilas e carotenóides da membrana do tilacóide, e observá-los para estudo, adicionou-se 10g de folhas de espinafre (Spinacia oleracea)em um béquer de 250ml, água fervente e uma pitada de Carbonato de cálcio, que foi homogeneizado. Depois, leva-se essa mistura para banho-maria de 3 a 5 minutos. Passado o tempo, removeu-se a água do béquer e adicionou-se um volume de 70ml de álcool etílico. Depois disso, o álcool com as folhas foi posto em banho-maria em torno de 15 minutos, para que a folha perdesse toda a pigmentação. Após isso,derramou-se o extrato em uma Placa de Petri, e descartaram-se as folhas. Depois, o papel-filtro foi colocado na Placa de