extraçao de dna

Assunto: Extração do DNA de células eucarióticas vegetais

1. Introdução: Para a análise do DNA de células eucarióticas, a primeira etapa importante é o seu isolamento. O procedimento a seguir é utilizado para extrair grandes quantidades de DNA a partir de cebola. Protocolos similares são usados nas extrações de DNA de outras fontes, como amostras de sangue, tecidos, etc.
A extração de DNA de células eucariontes consta fundamentalmente de três etapas:
• Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do material genético;
• Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas;
• Separação do DNA dos demais componentes celulares.

2. Objetivo:
2.1. Conhecer os princípios básicos da extração do material genético, a partir dos tecidos vegetais.
2.2. Estudar a estrutura e composição celular;
2.3. Identificar a localização do material genético na célula

3. Materiais, equipamentos e reagentes (8 turmas):
• Morangos maduros, tomate bem maduro (meio tomate por extração), banana (meia banana por extração), Catáfilos de cebola sem a casca picada (meia cebola por extração). Se usar cebola pique-a em pedaços bem pequenos em vez de macerá-la, ou Abóbora.
• 8 Estiletes ou facas de cozinha
• 8 sacos plásticos para maceração
• 16 béqueres de 150 mL
• 8 béqueres de 250 mL
• 8 bastões de vidro
• 8 provetas de 150 mL
• 1500 mL (1,5 L) de água destilada
• 8 palitos de madeira
• 8 colheres de sopa, 8 colheres de chá
• 4 recipientes contendo sal de cozinha
• 4 frascos com detergente (sem cor) de lavar louça com lauril
• Banho-maria (~60 ºC)
• Termômetro
• 4 peneiras ou coadores de chá
• 8 tubos de ensaio grandes
• 4 frascos com álcool comercial 98% (gelado)
• Isopor (pequeno) com gelo
• 4 Funil e suporte
• Papel de filtro

4. Procedimento:
• Selecionar 3 morangos e tirar os seus cabinhos verdes. Se for o tomate, banana ou cebola, separe metade do material. Com a abóbora, corte-a em pequenos pedaços e