experimento de genetica
Como já foi descrito anteriormente, existem várias etapas para se conseguir extrair o DNA, e cada uma delas tem uma função específica que torna possível a visualização do material genético. Segue-se o passo a passo com a explanação de cada etapa para assim alcançarmos o entendimento de toda reação.
Antes de tudo é preciso entender o porquê da cebola. Esse vegetal possui células grandes, o que facilita seu rompimentos e, além disso, possui um material genético ampliado auxiliando, assim, sua visualização.
Passo 1: Maceração da cebola
Ao picarmos a cebola exercermos uma ação mecânica que causa a rotura da parede celular e proporciona a dissociação de tecidos, ajudando que a solução (SDS e NaCl) penetre melhor e atinja um maior número de células.
Passo 2: Acréscimo do NaCl(3%) e do SDS(dodecil sulfato de sódio-10%)
O cloreto de sódio além de favorecer a desidratação da molécula de DNA também auxilia na neutralização da carga negativa do grupo fosfato do material genético, diminuindo a repulsão dentro da molécula.
O SDS é um detergente e como tal dissolve lipídios, nesse caso os que estão presentes na membrana plasmática e nuclear das células de cebola, liberando assim o ácido nucleico. O dodecil sulfato de sódio também desnatura algumas proteínas que estão associadas ao material genético.
Passo 3: Deixar a solução em banho maria por 20 minutos
Aumenta a velocidade de reação da degradação das membranas pelo detergente e desnatura algumas proteínas como as DNAses que tem como função a lise do DNA.
Passo 4: Filtrar e acrescentar o álcool (95%) gelado.
O uso do filtro serve para reter as paredes celulares e restos não aproveitáveis para a visualização do DNA.
O álcool desidrata o ácido nucleico não o tornando mais solúvel na água. Como o DNA também não é solúvel no próprio álcool (especialmente quando está em baixas temperaturas) nas condições apresentadas, fazendo-o se condensar ainda mais. Nota-se que por ser menos denso ele se