Estudo Físico-Químico das Proteínas

Universidade Federal Fluminense
Bioquímica IV - Farmácia

Relatório de Aula Prática
Estudo Físico-Químico das Proteínas

Data:
26/03/2014
Monitor:
Junior
Alunas:
Gabriela Alves;
Tamiris Ingrid Petito.

Introdução
O estudo dos aspectos importantes da bioquímica nos leva ao estudo das proteínas, portanto a existência de métodos é essencial possuir métodos adequados de purificação e quantificação destes compostos. Então o objetivo desta prática é realização desses métodos como a reação específica para detecção de proteínas e realização reação específica de detecção de aminoácidos, verificação a alteração de solubilidade de proteínas em presença de soluções salinas e solventes orgânicos; Verificação a ação de agentes desnaturantes; Observação da separação cromatográfica (cromatografia de exclusão molecular) de substâncias de pesos moleculares diferentes.
Materiais e Métodos
Materiais
• Reagente do Biureto: CuSO4 em solução alcalina; Solução diluída de proteínas; Solução concentrada de proteínas; Solução de ninhidrina 0,1g% (P/V); Solução de aminoácidos; Ácido tricloroacético (TCA) 10% (P/V); Solução saturada de sulfato de amônio (NH4)2 SO4; Solução tampão de fosfato de sódio 0,2 M, pH 7,0; Etanol gelado; Resina Sephadex G-25 (faixa de separação PM 1000-5000 D); Solução contendo compostos de diferentes pesos moleculares (azul de dextran: 2.000.000 D, vitamina B12: 1355 D em tampão pH 7,0, contendo sacarose).
Métodos
- Os 12 tubos de ensaio foram enumerados
Reação do Biureto:
• No Tubo 1 (tubo branco): foi colocado: 1 mL do reativo do Biureto + 0,5 mL de água destilada; No Tubo 2: foi colocado: 1 mL do reativo do Biureto + 0,5 mL da solução diluída de proteínas; No Tubo 3: foi colocado: 1 mL do reativo do Biureto + 0,5 mL da solução de aminoácidos;
Reação da ninhidrina:
• A água foi aquecida à 100oC; No Tubo 4 (tubo branco): foi colocado 2 mL da solução de ninhidrina + 0,5 mL de água destilada; No Tubo 5: foi