estudante

3. PROCEDIMENTOS METODOLÓGICOS 3.1 Coleta 3.2 Técnicas para análise de água

Colimetria

Tubos Múltiplos

Todo o procedimento metodológico utilizado para a técnica de tubos múltiplos segue o recomendado pelo Manual Prático de Análise de Água (FUNASA, 2009). Com a amostra devidamente coletada e acondicionada, devem-se preparar os meios de cultura. Para tubos múltiplos, utiliza-se caldo lactosado, caldo lactosado verde brilhante Bile a 2% e caldo EC. O primeiro corresponde à etapa presuntiva do método, enquanto que os dois últimos são inerentes à etapa confirmativa. É importante ressaltar que, caso a amostra de água não seja tratada, antes de realizar qualquer etapa, talvez seja necessário diluí-la. Para isso, deve-se preparar a água de diluição, que consiste numa mistura de duas soluções.
Para a primeira solução, pesa-se 34 gramas de fosfato monobásico dissolvendo em 500 ml de água destilada. Em seguida, deve-se ajustar o pH para 7,2 através de uma solução de hidróxido de sódio a 1N. Por fim, adiciona-se água destilada até que se complete 1 litro. Para a segunda solução, deve-se pesar 81,1 gramas de cloreto de magnésio hexahidratado e dissolver em 1 litro de água destilada. Com ambas as soluções preparadas, utiliza-se 1,25 ml da solução 1 e 5 ml da solução 2 na mistura que deve ser completada com água destilada até atingir 1 litro. Logo, teremos a água de diluição. Esta será distribuída em frascos, de modo que cada um contenha 90 + 2 ml da água de diluição após 15 minutos de esterilização em autoclave a 121°C. Com os frascos esterilizados, as diluições prosseguirão da seguinte forma: com uma pipeta estéril, adiciona-se 10 ml da amostra em um frasco obtendo a diluição 1:10 ou 10-1; posteriormente, a partir da primeira diluição, repete-se o procedimento, inserindo os 10 ml em um novo frasco obtendo, consequentemente, a diluição 1:100 ou 10-2, e assim sucessivamente.

Teste Presuntivo

Nesta etapa é utilizado como meio de cultura o caldo