elisa

DIAGNÓSTICO DE DOENÇAS INFECCIOSAS ATRAVÉS DO ELISA TESTE
Renan Bonrruque Groxco de Lima

O ELISA é um teste imunoenzimático usado para o diagnóstico de diversas doenças entre elas a AIDS e doença de chagas na medicina humana. O ELISA surge de uma necessidade por testes de melhor qualidade.
É um método qualitativo e quantitativo que possui alta sensibilidade e especificidade. A grande vantagem é conseguir detectar pequenas quantidades de anticorpos. O teste utiliza uma placa de poliestireno que tem a capadcidade de fixar proteínas, uma enzima conjugada com o anticorpo é usada para se ligar à antigenos ou anticorpos. A enzima conjugada muda a cor de um cromógeno, indicando a presença da proteína pesquisada.
A interpretação do ELISA e feito pela intensidade da cor desenvolvida pelo substrato é proporcional a quantidade de anticorpos presente no soro. A intensidade pode ser analisada por um espectrofotômetro, permitindo uma análise quantitativa
As desvantagens são a necessidade de um espectrofotometro e necessita de mão de obra especializada . Existe o teste direto e o indireto, no teste direto o objetivo é detectar o antigeno enquanto o indireto detecta as imunoglobulinas.
Este trabalho (Santurio et al. 2006) teve por objetivo descrever o desenvolvimento e a padronização de um ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para a detecção de anticorpos contra Pythium insidiosum no soro de eqüinos e de coelhos. Foram analisadas 72 amostras de soro de eqüinos sadios, 44 amostras de eqüinos com pitiose clínica, 48 amostras de soro de coelhos sadios e 24 amostras de soro de coelhos imunizados com antígenos de Pythium insidiosum.
Placas de poliestireno de 96 poços, foram sensibilizadas com antígeno solúvel diluído em tampão carbonato e incubadas overnight a 4ºC para adsorção do mesmo na superfície da placa. Após a incubação, as placas foram lavadas com tampão , secas a 37 ºC por 10 minutos e armazenadas a 4ºC até o momento do uso. As placas foram inicialmente