eletroforese relatorio
Técnica de separação de proteínas por migração de espécies carregadas eletricamente quando dissolvidos ou suspensos em uma solução tampão. Essa técnica foi introduzida cientificamente em 1939 por A.Tiselius e A.E. Kabat com o objetivo de separar partículas orgânicas. Quando essas substâncias são as proteínas sanguíneas, fala-se em eletroforese das proteínas. A eletroforese normalmente é utilizada para separar proteínas e moléculas de DNA e RNA.
A eletroforese de proteínas é de grande importância no diagnóstico diferencial de algumas enfermidades, na avaliação da gravidade de alterações clínicas hematológicas e no diagnóstico de processos inflamatórios, gamopatias e disproteinemias. É o teste mais utilizado para investigação de anormalidades protéicas presentes no sangue. Taxas elevadas de proteínas plasmáticas ocorrem em função da hemoconcentração ou do aumento da produção de globulinas, geralmente associado a processos inflamatórios. A hemoconcentração pode ser fisiológica, em casos de contração esplênica e policitemia vera.
A eletroforese em gel é um dos métodos mais utilizados para analisar misturas de proteínas ou outras macromoléculas. Os géis utilizados como suportes são de agarose e poliacrilamida, podem ser preparados com porosidade variável, propiciando separação das moléculas segundo o seu tamanho, alem da sua carga.
2. MATERIAIS
- papel filtro (tirar o excesso de corante)
- placa de petri
- cubas de coloração
- pinças histológicas
- secador
- cronômetro
- cuba e fonte de eletroforese
- fita gel de agarose
2.1 Reagentes
- soro humano
- negro de amido (corante)
- ácido acético
- solução tampão ph= 9,5
3. PROCEDIMENTOS
1º passo: Fez-se uma solução de 50 ml de ácido acético e 50 ml de solução tampão.
2º passo: Pipetou o soro humano para cada um dos capilares da fita gel de agarose. Regulou-se o pipetador para 0.5 ml.
3º passo: Para a coloração da fita de agarose mergulhou-se a fita inteira no negro de amido (como o lado das gotas para