EB2 Estudo Dirigido

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO CARLOS
DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA QUÍMICA
ENGENHARIA BIOQUÍMICA 2 – PROFª TERESA C. ZANGIROLAMI

ESTUDO DIRIGIDO
Alessandro Estarque de Oliveira – 498491
Anne Ayume Kadooka Accorsi – 438545
Mariana de Oliveira Reis – 498521

A/B) As técnicas de contagem de células na câmera de Neubauer e em placas é desaconselhável para contagem de organismos filamentosos ou aglomerados, podendo ser utilizados métodos indiretos como medidas de consumo de substrato e formação de produto, bem como VCC. Contudo, para organismos unicelulares o Hemocitômetro é uma boa opção.

C) Comparando quatro métodos de análise, dois diretos e dois indiretos, sendo eles
Massa Seca e Hemocitômetro (câmara de Neubauer), Volume de Células Compactadas
(VCC) e Turbidimetria ou Densidade Ótica (DO), respectivamente, o mais sensível é o último, seguido pelo Hemocitômetro, que permite a quantificação de valores de até 10-7 células/mL dependendo do seu tamanho. Contudo, justamente pela sensibilidade das técnicas, qualquer erro na contagem pode ser significativo no valor final.
Um dos erros possíveis no uso da técnica do Hemocitômetro é que, caso a câmara não esteja completamente cheia, o volume considerado no cálculo é errôneo. A presença de microrganismos patogênicos também tende a interferir no resultado. Para sanar tal problema, é utilizado calor previamente à contagem ou adição de solução contendo formalina (solução contendo 0,5% de formol em volume). A aderência dos microrganismos aos materiais usados neste tipo de contagem também é prejudicial ao procedimento, assim como sua aglutinação em líquidos ácidos. Isto pode ser resolvido suspendendo os organismos em solução salina contendo traços de detergente aniônico (ex, Teepol) tamponado com Na2HPO4 a pH 7,5.
Já para a DO, o problema é obter leituras na mesma faixa do espectro de luz de substâncias coloidais que podem participar da suspensão, bem como a rapidez da leitura, devido às células se decantarem rapidamente.

Tanto a