Dosagem De Prote Nas Do Leite Pelo M Todo Do Biureto

Práticas de Bioquímica - BQI 101
Relatório da Aula Prática do Capítulo 10

DOSAGEM DE PROTEÍNAS DO LEITE PELO MÉTODO DO BIURETO

INTRODUÇÃO
Existem vários métodos de quantificação de proteínas, sendo a escolha do método a ser empregado dependente de fatores como natureza da proteína, presença de interferentes, rapidez, sensibilidade, eficiência, custos de operacionalização, entre outros.

A- Espectrofotometria
A técnica espectrofotométrica se vale da absorção da luz pela substância a ser quantificada. Se um raio de luz monocromática atravessa a solução de uma substância capaz de absorver energia desse comprimento de onda, parte da luz que incide sobre a solução é absorvida e outra parte emerge do outro lado. Chama-se transmitância (T) a razão entre a intensidade da luz emergente (I) e a intensidade da luz incidente (IO), em que T=I/Io. # LEI DE LAMBERT-BEER
A transmitância da solução de uma substância que absorve a luz depende da natureza da substância, de sua concentração e da espessura da solução atravessada pela luz. Essa dependência é descrita quantitativamente pela lei de Lambert-Beer, segundo a qual é determinado pelo comprimento de onda:
T = 10 -kcL em que T é a transmitância; k, uma constante característica da substância denominada coeficiente de extinção molar; c, a concentração da substância, e L, a expessura da solução atravessada pela luz. Esta equação pode ser convertida em uma forma linear se tomar o logaritmo decimal de ambos os membros: log T = -kcL ou -log T = kcL
O valor de -log de T é chamado de absorvância (A). Assim, a absorvância de uma solução em determinado comprimento de onda é diretamente proporcional à concentração da substância e à espessura da solução atravessada pela luz.

B- Equipamentos Espectrofotométricos
Para a determinação da transmitância ou absorvância de uma solução, são empregados colorímetros ou espectrofotômetros. Os colorímetros são utilizados para a quantificação de substências que absorvem energia radiane do