DM funcionais DNA
DNA binding proteins
Identificação da periferia da molécula de DNA por proteínas
Interações comuns entre aminoácidos e bases nucleotídicas especialmente no sulco maior da cadeia de DNA "major groove"
Domínios comuns de ligação ao DNA
Helix-turn-helix
Homeodomain
Zinc-finger
Leucine zipper
Basic helix-loop-helix
Interação de b-sheets com a dupla hélice do DNA
Interação de cadeias polipeptídicas com a dupla hélice do DNA
Heterodímeros
Bibliografia
Lodish 7ª Ed.
Alberts, 5ª Ed.
Ainda recorrendo à espectrofotometria, calculámos o grau de pureza da amostra. A partir de radiações com comprimentos de onda de 260 nm (comprimento de onda para o qual é máxima a radiação absorvida pelo DNA genómico) e de 280 nm (comprimento de onda para o qual é máxima a radiação absorvida por proteínas, por exemplo histonas e DNases) é possível determinar a absorvância de ácidos nucleicos e proteínas e depois calcular o grau de pureza. Sendo o DNA a substância em foco na atividadeRelatório de Genética Molecular | Docente: Filipe Monteiro Trabalhos práticos 1 e 2
Objetivos do Trabalho Prático: Extração de DNA genómico de células hepáticas (maceração de uma porção do fígado) de ratinho , quantificação da sua concentração e do seu grau de pureza (espetrofotometria) (prática 1); Amplificação, por PCR (Polimerase Chain Reaction), de fragmentos do DNA genómico extraído (genes Drg11 e LacZ delimitados por primers) (prática 2); Separação dos fragmentos de DNA genómico por Eletroforese em gel de agarose (prática 2); Análise dos resultados e determinação do genótipo dos ratinhos relativamente ao gene Drg11 (objetivo final).
Resultados:
Na 1ª aula prática extraiu-se DNA genómico e, posteriormente, através da espetrofotometria foi possível obter um valor da sua concentração (170,7 ng/μl). Além disso, o espetrofotómetro indicou-nos a absorvância da amostra a 260 nm e a 280 nm (Tabela I) o que possibilitou