Diferenciação da Taenia

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Jardim et al.
Ciência Rural, Santa Maria, v.36, n.1, p.166-172, jan-fev, 2006
ISSN 0103-8478

Diferenciação específica entre Taenia saginata e Taenia solium por ensaio de PCR e duplex-PCR

Specific discrimination between Taenia saginata and Taenia solium by one step PCR assay and duplex-PCR

Eurione Antônio Garcia da Veiga Jardim 1 Guido Fontgalland Coelho Linhares 2
Fernando Araripe Gonçalves Torres 3 José Luiz de Barros Araújo 4
Silvia Minharro Barbosa 5

RESUMO
Este estudo teve como objetivo a padronização de protocolos e a seleção de novos primers para a identificação espécie-específica de Taenia saginata e Taenia solium através da reação em cadeia da polimerase (PCR) e duplex-PCR.
Inicialmente, foram recuperadas seqüências depositadas no
GenBank (acesso n° AB020399 para T. saginata e n° AB020395 para T. solium) referentes ao gene da subunidade maior do ribossomo (LSU RNAr) de tenídeos. A partir do alinhamento das seqüências, um primer genérico denominado TBR-3 (5’ggcttgtttgaatggtttgacg- 3’) foi selecionado de região conservada e, de diferentes regiões semi-conservadas, os primers específicos
TBR-4 para T. saginata (5’-cgactcatgaagataaacaaggt-3’) e TBR5
(5’-cggtcgaacagaccataaatct-3’)
e
TBR-6
(5’gctactacacctaaattctaacc- 3’) para T. solium. Os primers foram avaliados quanto à especificidade através da PCR empregandose DNA total (DNAt) de amostras de cisticercos e proglotes dos parasitos, previamente identificadas por critérios morfológicos.
O par de primers TBR-3/TBR-4 permitiu a amplificação específica do fragmento esperado de 328 pb a partir do DNAt de
T. saginata. Os pares TBR-3/TBR-5 e TBR-3/TBR-6 permitiram a amplificação, respectivamente, dos fragmentos específicos de
310pb e 286pb a partir do DNAt de T. solium. A identidade dos produtos de PCR foi comprovada comparando-se a seqüência dos amplicons obtidos às seqüências de referência do gene LSU
RNAr registrado no GenBank (n° AB020399 e n° AB020395). As
reações