Determinação do ponto isoelétrico da caseína

DETERMINAÇÃO DO PONTO ISOELÉTRICO DA CASEÍNA

O objetivo desta prática foi a determinação do Ponto Isoelétrico da Caseína, bem como interpretar níveis de turbidez.

Material utilizado: Pipetas, pêra de sucção, tubos de ensaio, Erlenmeyer, pHmetro e copo de Béquer.

Metodologia:

Experimento 1 – Extração da Caseína
Aqueceu-se 150mL de água destilada a 38ºC e adicionou-se 50mL de leite. Logo após, a esta solução foi adicionado, gota a gota, a solução de ácido acético, até o aparecimento de um precipitado.
A parte citada agora já estava pronta no laboratório, para economizarmos tempo. Mas ela foi feita da seguinte forma:
Deixou-se sedimentar durante 20 minutos e decantar o sobrenadante da solução. Adicionou-se ao precipitado 20mL de etanol e misturou-se bem.
Foi filtrado ou centrifugado a 3000 rpm por 10 minutos e o filtrado, ou sobrenadante, foi desprezado.
Ao precipitado adicionou-se 5mL de éter etílico e misturou-se por agitação.
Por fim, decantou-se o sobrenadante e secou-se o precipitado, que é a Caseína, em papel filtro.

Experimento 2 – Preparação de uma solução de Caseína
Colocou-se, em um frasco Erlenmeyer, 1 grama da Caseína que foi obtida do experimento anterior e adicionou-se 50mL de água destilada para ressuspender a Caseína.
Adicionou-se 25mL da solução de hidróxido de sódio e agitou-se lentamente, para que não formasse espuma, até a Caseína se dissolver completamente.
Adicionou-se 25mL da solução de ácido acético e agitou-se lentamente.
Logo após, com o ácido e com a base, ajustou-se o pH para um valor em torno da neutralidade.

Experimento 3 – Determinação do Ponto Isoelétrico da Caseína
Numerou-se 9 tubos de ensaio, conforme a tabela:

Foi adicionado 0,5mL de Caseína, preparada anteriormente, em cada tudo e agitou-se lentamente, para não fazer espuma.
Logo após a agitação verificou-se a turbidez, que foi anotada na tabela abaixo, bem como o pH.

Quadro de Resultados:
Tubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 pH 6,1 5,93 5,66