DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNAS

Danilo Rodrigues de Melo
Denilson Araújo Lira
Kamila Nascimento.

DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNAS

Palmas, TO – 2014
Danilo Rodrigues de Melo
Denilson Araújo Lira
Kamila Nascimento.

DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNAS

Palmas, TO - 2014

1. INTRODUÇÃO

As proteínas são polímeros de aminoácidos unidos por ligações, denominadas ligações peptídicas, uma ligação peptídica é a união do grupo amino (-NH2) de um aminoácido com o grupo carboxila (-COOH) de outro aminoácido, através da formação de uma amida. Além disso, os diferentes grupamentos “R” encontrados nos aminoácidos influenciam na estrutura, na funcionalidade e nas propriedades das proteínas.
A detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações especificas com determinados reativos, os quais originam substâncias coloridas que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação.
Dentre os métodos utilizados, situa-se o método de biureto, que é baseado na reação do sulfato de cobre em meio alcalino (reativo de biureto), com proteínas e peptídeos. O nome do método provém do fato de que a ureia aquecida dará reação positiva, com desprendimento da amônia.
O reativo de biureto é a solução de sulfato de cobre (CuSO4) e tartatato duplo de sódio e potássio (KNaC4H4O6) que AP reagir com os íons cúpricos, forma um produto de coloração violáceo. Esse reativo é utilizado na identificação de compostos proteicos, pois as ligações na molécula de biureto são semelhantes às ligações peptídicas na formação de proteínas.
A reação de biureto é positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos. A reação é também positiva para substâncias que contêm duas carbonilas (-CONH2) ligadas diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio. Dependendo da complexidade da proteína ou do peptídeo em questão, a cor do produto de reação a presença do biureto varia