Determinaçao de quinino
ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCÊNCIA
MOLECULAR (FLUORÍMETRIA)
DETERMINAÇÃO DE QUININA EM ÁGUA TÔNICA
Introdução Um analito no estado excitado possui energia maior que num estado de mais baixa energia.Quando o analito retorna a um estado de energia mais baixo, esse excesso de energia é liberado. Existem varios mecanismos espectrocopicos em que esse proceso ocorre, dentre os quais podemos destacar a Fotoluminescencia, que por sua vez é dividida em duas categorias, a fluorescência e fosforecência. A primeira se dá quando há absorção de um fóton de radiação ultravioleta ou visível por um eletron de valência no estado singleto de spins opostos de maneira que este, passa do seu estado fundamental para o excitado com a consevação do spin com duração entre 0,0001s e 0,00000001s. Assim, a fluorescencia é um processo rápido. Porém, quando um elétron no estado singleto excitado é levado ao estado tripleto excitado e seu spin não é emparelhado com o do estado fundamental, diz-se que é um processo de fosforescêcia. Este varia em torno de 0,0001s a 10000 s após a fonte de excitação ser retirada. [1]
Fig. 1. (ref.1) a) elétron no estado fundamental b) processo de fluorescência; c) processo de fosforescência.
O relaxamento para o estado fundamental da molécula ou analito se dá por uma série de mecanismos em que há ou não emisão de energia radiante (fótons) ou irradiante entre eles o relaxamento vibracional e conversão interna. Na fluorescencia, por ser um método rápido, é observada se o meio de relaxamento mais eficiente que o vibracional e conversão interna. A expressão que mede a fração de moléculas que retornam ao estado fundamental é Φ e que varia de 1 a 0 . A intensidade de fluorrescencia If, é proporcional à quantidade de radiação que é absorvida e ao rendimento quântico da fluorescência, pela expressão: If=k Φf(P0−PT), em que k representa uma constante que depende da eficiência em se coletar e detectar a emissão