Cromatografia de Aminoácidos
Introdução
Na aula prática recebemos instruções e executamos procedimentos sobre a cromatografia de Aminoácidos por meio do papel contendo silica gel. A cromatografia é essencialmente um método físico de separação em que os componentes a serem separados são distribuídos entre duas fases, uma estacionária e outra móvel através da primeira. Dessa forma, ela ocorre como resultado de processos repetidos de absorção e desorção durante o movimento dos componentes da amostra ao longo da fase estacionária. A separação é devida à diferença de constantes de distribuição de cada um dos componentes da amostra. A informação obtida de um ensaio cromatográfico é dada num cromatograma, isto é, um registro de concentração ou da massa dos componentes da amostra em função do tempo ou do volume de fase móvel. A informação obtida por meio de um cromatograma inclui uma indicação da complexidade da amostra com base no número de picos ou manchas, informação qualitativa com base na posição, na determinação da posição dos picos ou das manchas. Já a informação quantitativa, ou revelação, é realizada com base no valor da variação da concentração dos componentes em função do tempo (área do pico ou intensidade da mancha). A distinção entre os principais métodos cromatográficos é feita em termos das propriedades da fase móvel.
Objetivos da Prática Adquirir conhecimentos sobre a cromatografia de aminoácidos e identificá-los por meio do procedimento usando papel de silica gel.
Discussão dos Resultados Inicialmente, demarcamos a Fase Estacionária e Fase Móvel, de modo que, a fase estacionária deveria medir 1 cm das extremidades, já a fase móvel mediu 5,9 cm. Colocamos uma gota de aminoácidos na lâmina com gel de sílica usando o capilar. Em seguida, colocamos a lâmina dentro do becker com solvente (n-butanol, ácido cético e água) tampamos com a placa de petri, e deixamos o solvente agir até chegar a marcação superior.