Coloração

MÉTODOS DE COLORAÇÃO

Baseia-se na diferença de composição química e espessura das paredes bacterianas de que depende a permeabilidade ao álcool e à acetona e, em conseqüência, a dissolução mais ou menos rápida de complexos corados formados no citoplasma. Esta coloração permite dividir as bactérias em dois grandes grupos: as bactérias gram (+) e as gram (-).

A coloração de gram depende não só da técnica, dos microrganismos como também da idade da cultura bacteriana. Assim a positividade ao gram enfraquece com o envelhecimento.

Uma das principais características da célula bacteriana diz respeito a sua morfologia (forma, tamanho, arranjo e estrutura). A observação destas características ao microscópio tem exigido constantemente o emprego de técnicas de coloração no sentido de relevar uma expressiva gama de detalhes.
Estudando o comportamento das bactérias em relação a certos corantes, comprovou-se, empiricamente, a existência de reações de soluções corantes características para determinados grupos bacterianos. Dentre os métodos de coloração diferencial, o de Gram é o mais usado na bacteriologia, sendo indispensável na identificação de organismos.

É sabido que uma série de fatores influenciam os resultados da coloração de gram, entre eles podemos citar: densidade celular de esfregaço, concentração do corante, natureza e tempo de uso do agente descorante.

O método de gram se baseia no fato de que, quando certas bactérias são coradas pelo Cristal Violeta e depois tratadas pelo Lugol, forma-se um composto de coloração escura (roxo-violeta) entre o iodo e o cristal violeta, o qual é fortemente retido por certas bactérias e não pode ser removido pelo tratamento subseqüente com o álcool. Tais bactérias são ditas gram-positivas (gram+). Outras bactérias deixam-se descorar facilmente pelo álcool e são classificadas como gram-negativa(gram-). Após tratamento pelo álcool usamos um contra corante (fucsina ou safranina) e observamos que as bactérias (gram-) tem a