coloração de gram
2014
Introdução.
Aplicar o conhecimento teórico sobre a constituição e função das membranas e paredes celulares.
Método de coloração de Gram.
Esta técnica foi desenvolvida em 1884 pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachin Gram (1853-1938) e serve para a visualização e diferenciação de bactérias.
É baseado na capacidade da parede celular das bactérias Gram-positivas reterem o corante violeta genciana durante um tratamento com lugol (iodo), enquanto que a parede celular das bactérias Gram-negativas não fazem.
Confeccionar uma lâmina e utilizar a técnica de gram para visualizar a morfologia das bactérias ao microscópio óptico.
Materiais e Métodos.
Material.
Lâmina;
Solução salina;
Alça bacteriológica;
Bico de Bunsen;
Colônia de bactérias;
Cristal Violeta, Lugol, Álcool-acetona, Fucsina;
Papel filtro;
Microscópico.
Métodos
Sobre a lâmina de vidro, colocou-se uma gota de solução salina. Com a alça bacteriológica tocar levemente na superfície da colônia (Staphylococcusaureus) e emulsionar o material na gota de solução salina. Deixar secar.
Passou-se o esfregaço na chama do bico de Bunsen três vezes a fim de fixar o material.
Posteriormente cobriu-se o esfregaço seco com violeta de genciana (cristal violeta) e deixar por um minuto.
Lavou-se com água corrente.
Esgotou-se a lâmina, e a cobriu com solução de lugol e deixar por um minuto.
Esgota-se a lâmina e, mantendo a mesma inclinada, pingaram-se gotas de Álcool-acetona até que não se desprenda mais corante da preparação.
Lavou-se com água corrente.
Cobriu-se a lâmina com solução de fucsina e deixar por trinta segundos.
Lavou-se a lâmina e a cobriu com papel filtro para a secagem da lâmina.
Em seguida examinou-se ao microscópio com a objetiva de imersão.
Resultados:
Após a realização do procedimento de Gram, a lâmina exibiu cocos gram-positivos
Conclusão.