Coloração de gram
Setor de Tecnologia
Departamento de Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA – COLORAÇÂO SIMPLES E
COLORAÇÃO DIFERENCIAL DE GRAM
Curitiba
15/04/2014
INTRODUÇÃO
As diversas técnicas de fixação e coloração existentes podem ser muito úteis para o estudo da morfologia de bactérias. Os detalhes estruturais microscópicos, a falta de contraste natural destes detalhes e o movimento das bactérias, tornam quase impossível o estudo morfológico exato destes organismos nos simples exames a fresco.
A fixação é a imobilização dos microrganismos e das estruturas celulares pelo calor, e a coloração é a adição de corantes para que haja destaque em certas partes da estrutura bacteriana, facilitando a visualização.
Na aula prática da disciplina de Processos Fermentativos, realizamos dois experimentos, coloração simples e coloração diferencial de gram.
A coloração simples consiste na adição de um único corante e O objetivo básico desse método é mostrar toda a estrutura do microrganismo incluindo a forma e as estruturas básicas, se haver a diferenciação entre tipos de bactérias. O mecanismo da coloração de Gram se refere à composição da parede celular, sendo que as Gram-positivas possuem uma espessa camada de peptideoglicano e ácido teicóico, e as Gram-negativas, uma fina camada de peptideoglicano, sobre a qual se encontra uma camada composta por lipoproteínas, fosfolipídeos, proteínas e lipopolissacarídeos.
Outra explicação baseia-se também em diferenças de permeabilidade entre os dois grupos de bactérias. Nas Gram-positivas, o complexo cristal violetaiodo (CV-I) é retido na parede após tratamento pelo álcool-acetona, o que causa, provavelmente, uma diminuição do diâmetro dos poros da camada de glicopeptídeo ou peptideoglicano da parede celular. A parede das bactérias
Gram-negativas permanece com porosidade suficientemente grande, mesmo depois do tratamento com álcool acetona,