coloração de GRAM
Coloração de Gram é uma técnica de coloração para diferenciação de microorganismos através das cores, para serem observados em microscópio óptico. A técnica recebeu este nome em homenagem ao médico dinamarquês Hans Cristian Joaquim Gram.
Por volta de 1884, Hans Gram observou que as bactérias, após serem tratadas com diferentes corantes, adquiriram cores diferenciadas. Assim, as que ficavam roxas foram classificadas de Gram-positivas, e as que ficavam vermelhas, foram chamadas de Gram-negativas. A técnica de Gram é fundamental para a taxonomia e identificação das bactérias, sendo muito utilizada atualmente, como técnica de rotina em laboratórios de bacteriologia.
Temos como exemplo o gênero Salmonella que pertence à família Enterobacteriaceae e consiste de bacilos Gram-negativos, não formadores de esporos. Porém, essa característica pode variar, já que algumas amostras de Salmonellas podem adquirir plasmídios que transportem genes que codificam enzimas para a fermentação da lactose e assim desenvolverem colônias lactose-positivas nos meios de isolamento, semelhantes a Escherichia coli.
TORTORA, Gerard J; FUNKE, Berdell R; CASE, Christine L. MICROBIOLOGIA. 8ª Edição. Editora Artmed. 2005.
Objetivos
Temos como objetivo neste relatório explicar a aplicação das técnicas de coloração de Gram para identificação de membranas Gram positivas ou Gram negativas.
Desenvolvimento
A coloração de Gram é um dos procedimentos de coloração mais úteis no laboratório de bacteriologia, para o desenvolvimento dessa técnica utilizaremos os seguintes materiais:
- Lâmina
- Bico de Bunsen
- Alça de semeadura
- Microscópio
- Óleo de imersão
- Álcool 70%
- Água destilada
E reagentes:
- Cristal violeta
- Lugol
- Álcool
- Safranina ou Fuscina
Metodologia
A técnica inicia-se com o preparo do esfregaço bacteriano de Salmonella, onde começamos por retirar a lâmina da solução em álcool e secá-la na chama do bico de Bunsen, deixando a lâmina em descanso por