Clonagem Molecular/ Expressão de genes embactérias

Clonagem Molecular
-> Tudo se iniciou em 1972 num Congreso quando Stanley Cohen e Herbert Boyer se conheceram.

-> Stanley Cohen trabalhava com plasmídios bacterianos ( que é um pequeno anel de DNA extra-cromossoma ) e ele tentava isolar genes para resistência a antibióticos, e Boyer trabalhava com enzimas de restrição.

-> Ao conversarem ambos resolveram tentar algo novo, cortar o DND de plasmídios e emendá-lo a um outro DNA por meio de uma enzima chamada ligase e introduzir esta molécula produzida chamada de ( DNA recombinante ) em bactérias. O objetivo era verificar se a molécula produzida era capaz de se multiplicar nessas bactérias e gerar cópias idênticas.

-> A partir dessa ideia, Boyer e Cohen desenvolveram uma das mais revolucionárias metodologias para multiplicar segmentos selecionados de DND. A aplicação disso possibilitou a produção de diversas proteínas humanas de interesse médico, como o hormônio do crescimento, a insulina, o fator 8 de coagulação sanguíneas, entre outros.

-> Dessa forma a partir de uma única célula bacteriana transformada (que recebeu o plasmídio recombinante ) obtêm - se bilhões de bactérias idênticas, cada um com uma ou mais cópias do DND recombinante.

Expressão de genes em Bactérias

-> A primeira proteína humana produzida pela engenharia genética em células bacterianas e aprovada para uso em pessoas foi a insulina humana usada para os diabéticos.

-> Mas porque insulina humana? Por que até então a insulina era tirada de pâncreas de bois e porcos, obtidos em matadouros, mas apesar dessa insulina ser semelhante ao dos humanos, ela podia causar problemas alérgicos a alguns diabéticos.

-> Porém a insulina produzida em bactérias transformadas , são idênticas á do pâncreas humano e não causa alergia, substituindo então a insulina