Caracterização de proteínas

Relatório Prática 02
PEREIRA, R. RODRIGUES, M.G.

CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNAS
FUNDAMENTO
A detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações especificas com determinados reativos, os quais originam substâncias coloridas que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação.
Dentre os métodos utilizados, situa-se o método do biureto, que é baseado na reação do sulfato de cobre em meio alcalino (reativo do biureto), com proteínas e peptídeos. O nome do método provém do fato de que a uréia aquecida dará reação positiva, com desprendimento de amônia.

A caracterização de proteínas pode ser feita utilizando reações de coloração ou precipitação. As reações de caracterização através da colorimetria pode ser realizada a partir de grupos aminos (reação com ninidrina) ou a partir das ligações peptídicas (reação com biureto).
A caracterização de proteínas utilizando o método de biureto ocorre devido a interação do cobre com os grupos amidas das ligações peptídicas, originando um complexo de cor púrpura (violeta).
O reagente de biureto contém sulfato de cobre que apresenta uma coloração azul. Quando o cobre entra em contato com as ligações peptídicas de peptídeos e proteínas ele forma um complexo de coloração violeta. Quanto maior for a quantidade de proteínas no meio maior será a intensidade de cor.

OBJETIVOS

* Caracterizar a presença de proteínas em material biológico; * Demonstrar as reações de coloração para proteínas.

VIDRARIA E EQUIPAMENTO

* Pipetas de 2 e 5 mL * Estantes e tubos de ensaio * Cálice de 15mL * Béquer * Pêra
REAGENTES

* Reagente de biureto * Hidróxido de sódio * Clara de ovo * Água destilada

TÉCNICA
1. Enumerou-se os tubos de ensaio de 1 a 3;
2. Adicionaram-se os reagentes como mostrado na tabela abaixo; Tubos | Clara | NaOH | Reagente de | Água | Volume final | Observações | 1 | 1,0 mL | -------- | 1,0 mL | 4,0 mL | 6,0 mL | | 2 | 1,0 mL | 3 gotas | 1,0