biomedica

1. INTRODUÇÃO TEÓRICA
A fluorimetria consiste na técnica utilizada na determinação qualitativa ouquantitativa de substâncias nas quais ocorre o fenômeno da fluorescência, que,segundo Mendham et. al.(2002), é resultado da absorção de energia radiantee da posterior emissão de parte dessa energia.A fluorescência, assim como a fosforescência, fenômeno similar, são casosdistintos de um fenômeno que recebe a denominação generalista defotoluminescência. A diferença entre estes dois fenômenos, segundo Skoog et.al.(2002), é que na fluorescência, o intervalo de tempo entre a captação dofóton e a emissão da energia captada é extremamente curto (<10-5s, podendoser de até 10-12s), enquanto na fosforescência, esse intervalo de tempo émaior, podendo ser de alguns segundos ou até mais. Este retardo no tempo daemissão de energia ocorre porque a molécula entrou num estado de energiachamado estado excitado triplete, caracterizado por um desemparelhamentonos orbitais eletrônicos, ou seja, os spins dos elétrons passaram a estar paralelos. Na fluorescência, a energia é emitida mais rapidamente pelo fato dea molécula estar num estado chamado estado excitado singlete, no qual osorbitais eletrônicos estão emparelhados, e os spins dos elétrons,consequentemente, em direções opostas. A fluorescência ocorre com aliberação de energia que faz com que a molécula sofra uma transição doestado excitado singlete para o estado fundamental singlete, no qual amolécula se encontrava antes da absorção da energia que a excitou.O diagrama sugerido por A. Jablonski para os níveis de energia ilustra oprocesso de absorção e emissão de luz.
A fluorescência tem sido usada para estudar vários sistemas químicos, físicos e biológicos1-6. Apesar da grande quantidade de informações que se consegue com medidas estáticas, é interessante examinar também a fluorescência resolvida no tempo. Com esta técnica pode-se obter o tempo que a molécula permanece no estado excitado, ou seja, seu tempo de vida. Com isto é